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细胞培养/细胞鉴定/培养基/血清

IPRODUCT / 产品系列

小鼠肾小球系膜细胞

小鼠肾小球系膜细胞

小鼠肾小球系膜细胞
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小鼠肾小球系膜细胞

小鼠肾小球系膜细胞

Cat NO.: CP-M057

1.产品名称:小鼠肾小球系膜细胞

2.组织来源:肾组织

3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

小鼠肾小球系膜细胞分离自肾小球组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球系膜是位于肾小球毛细血管袢之间的一种特殊间充质,由系膜细胞和系膜基质组成。肾小球系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞,具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。肾小球系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现。肾小球系膜细胞的培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。系膜细胞的主要作用可能有:①收缩作用,入球小动脉和出球动脉的收缩作用受系膜细胞的调节,以影响毛细血管袢的内压和滤过率;②支持作用,它填充于毛细血管袢之间,支持毛细血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜内的大分子物质和蛋白质;④分泌肾素,在肾缺血或免疫复合物沉积时,系膜细胞增生且分泌肾素。

本公司生产的小鼠肾小球系膜细胞采用机械研磨法结合不同孔径不锈钢网筛过滤后使用胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息:

DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等

我们推荐使用上海淳麦小鼠肾小球系膜细胞专用完全培养基(产品货号:CM-M057)作为体外培养小鼠肾小球系膜细胞的培养基。


MEG-01 人成巨核细胞白血病细胞

Cat NO.: CL-0498

细胞名称

MEG-01(人成巨核细胞白血病细胞)

种属

年龄(性别)

男;55岁

组织来源

生长特性

悬浮

细胞形态

淋巴母细胞样

背景描述

MEG-01细胞源自一位CML患者成巨核细胞转换期的骨髓细胞。细胞质因子Ⅷ和表面球蛋白Ⅱb/Ⅲa、高碘酸-Schiff(PAS)反应;α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶阳性;髓过氧化物酶、α-丁酸萘酯酶、氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和碱性磷酸酶阴性。用单克隆抗体BA-1(抗B细胞、粒性白细胞),HPL-3(抗球蛋白Ⅱb/Ⅲa)和20.3(抗单核细胞、血小板)染色成阳性,其他淋巴和骨髓类抗体成阴性。

生长培养基

RPMI-1640(货号:PM150110)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120)

培养条件

气相:空气,95%;CO2,5%

温度:37℃

小鼠肾小球系膜细胞培养方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。


原代细胞与细胞系有什么区别?
     细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别?倍增是培养物中细胞总数加倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理?收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养?推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作,如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。

 

     上海淳麦生物科技有限公司是一家专注于研发和生产免疫细胞及干细胞相关产品的生物高科技企业,可以为各类科研机构提供符合GLP标准规范的免疫细胞和干细胞及相关的实验技术服务,现已申请原代细胞试剂盒3项专利,我们致力于打造国内最专业的原代细胞研发和服务平台,做“您身边的细胞培养专家”。公司对细胞培养提供全程服务,产品涵盖免疫细胞及干细胞、细胞系、完全培养基、无血清培养基、基础培养基、血清、转染试剂、胰酶等细胞培养及实验相关产品。